超高保真DNA聚合酶的工作原理

　　超高保真DNA聚合酶的工作原理

　　超高保真DNA聚合酶通过‌双重机制‌确保DNA复制的准确性，其核心功能依赖于‌5'→3'聚合酶活性‌和‌3'→5'核酸外切酶(校读)活性‌的协同作用‌。

　　1. ‌聚合与校正机制‌

　　5'→3'聚合酶活性‌：以模板链为基础，催化dNTP通过磷酸二酯键连接至新生链的3'-OH端，实现DNA链的延伸‌。

　　3'→5'外切酶活性‌：当错配碱基掺入时，未配对的3'末端被外切酶识别并切除，随后重新掺入正确核苷酸，显著降低错配率(保真性可达Taq酶的83倍)‌。

　　DNA聚合酶的基本功能

　　DNA聚合酶的工作步骤

　　常见误区

　　PCR技术中的Taq酶

　　2. ‌热启动技术增强特异性‌

　　部分高保真酶(如Hieff Canace® Plus)通过单克隆抗体封闭常温下的酶活性，避免非特异性扩增。高温激活后，抗体解离，酶活性恢复，提升PCR的灵敏度和产物特异性‌。

　　3. ‌分子开关效应‌

　　高保真酶可通过“聚合-外切酶"双中心的动态切换，对错配引物终止延伸(“关闭"反应)，进一步保证产物纯度，适用于SNP分析等精准应用。

　　关键优势

　　高保真性‌：错配率低至10^-6^/碱基‌。

　　长片段扩增‌：延伸因子支持13 kb以上片段扩增‌。

　　复杂模板兼容性‌：优化缓冲液适应高GC或二级结构模板‌。

　　通过上述机制，超高保真DNA聚合酶成为基因编辑、测序等高精度实验的核心工具‌。

　　注意：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

　　天津天正信达供应：RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材，开云在线登录拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台，主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。