如何判断ELISA试剂盒是否开封后仍有效?

　　如何判断ELISA试剂盒是否开封后仍有效?

　　ELISA试剂盒开封后是否仍有效，需通过‌外观检查、性能验证和保存条件追溯‌三方面综合判断。确认方式是在使用前进行标准曲线和质控样本检测，以验证其实际检测能力。

　　一、外观与物理性状检查

　　若试剂出现以下异常，提示可能已失效：

　　液体试剂异常‌：

　　标准品、酶结合物或底物出现‌浑浊、沉淀或分层‌;

　　TMB显色液变蓝或呈现淡黄色，提示氧化或污染。

　　包装与环境异常‌：

　　酶标板密封袋破损、漏气，板条受潮发白或变形;

　　干燥剂结块或变色，说明密封失效，湿气已侵入。

　　储存条件不符‌：

　　未按说明书要求保存(如应存于-20℃却长期置于4℃);

　　经历反复冻融，尤其对标准品和酶标记物影响显著。

　　二、关键性能验证实验

　　即使外观正常，也建议通过以下实验确认活性：

　　标准曲线验证‌

　　配制梯度浓度的标准品，绘制标准曲线：

　　相关系数 ‌R² ≥ 0.99‌ 为合格;

　　浓度孔OD值应 >1.0，否则提示灵敏度下降。

　　质控样本检测‌

　　使用已知浓度的阳性/阴性质控样本进行测试：

　　回收率应在 ‌80%–120%‌ 范围内;

　　阴性对照不显色，阳性对照信号稳定。

　　重复性测试(CV值评估)‌

　　同一样本做复孔检测，计算批内变异系数：

　　CV < 10%‌ 表示重复性良好;

　　若CV偏高，提示试剂不稳定或操作误差。

　　三、保存时间与使用建议

　　开封后建议在1个月内用完‌，部分资料指出有效期限不少于28天;

　　若保存得当(密封、干燥、-20℃)，虽可能延长使用时间，但每次使用前均应重新验证性能;

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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