BUNSEN快讯：ELISA试剂盒实验怎样才能减少实验误差

　　BUNSEN快讯：ELISA试剂盒实验怎样才能减少实验误差

　　ELISA试剂盒试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。

　　减少ELISA试剂盒实验误差的方法包括以下几个方面‌：

　　‌操作细节的注意‌：在实验过程中尽量少说话，防止唾液掉进酶标条中;加入一抗二抗需要放入37°C;如果同时做多个板子，多个板子不要叠放在一起;尽量少用排枪;加样时，由低浓度向高浓度加，这样可以减少跳孔的几率;勤换枪头‌。

　　‌移液器的使用规范‌：确保移液枪的准确性，误差不能超过2%。可以使用水和电子天平进行确定，但有专业人员进行矫正。吸取不同的液体后，要更换枪头，即使是吸取标准品时也要更换‌。

　　‌试剂的保存和使用‌：试剂盒中的所有试剂应按说明书中要求储存。开始使用试剂盒时，确保所有试剂已预先平衡至室温(除非特殊温度要求)。如不打算一次性用完整个试剂盒试剂，只准备实验当天所需的试剂，因为很多试剂是以10X或其它浓缩母液提供，大部分试剂盒仅测试母液状态下的稳定性‌。

　　‌实验操作的具体步骤‌：

　　‌试剂平衡‌：实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂恢复到室温，以使结果更稳定。

　　‌底物避光保存‌：实验时，底物要避光保存。

　　‌吸取液体速度‌：用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。

　　‌加样技巧‌：将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能‌。

　　‌温浴和洗板‌：温浴时要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。洗板时，每次洗液加入后应静置1分钟，使清洗更加干净。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在吸水纸上用力拍干‌。

　　‌样本处理和保存‌：

　　‌血清和血浆‌：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可检测。或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融‌。

　　‌组织匀浆‌：用预冷的PBS冲洗组织，去除残留血液后，将组织剪碎并与对应体积的PBS加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。最后将匀浆液离心取上清检测‌。

　　‌细胞培养物上清‌：1000×g离心20分钟，取上清即可检测。或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融‌。

　　通过以上方法，可以有效减少ELISA试剂盒实验中的误差，提高实验结果的准确性。

　　除了以上几点之外，以下的小细节也会帮您减少实验误差：

　　1.做实验时少说话，防止唾液掉进酶标条中。

　　2.加入一抗二抗需要放入37°。

　　3.如果同时做多个板子，多个板子别罗一起;尽量少用排枪。

　　4.加样时，由低浓度向高浓度加，这样减少跳孔的几率。

　　5.勤换枪头。

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　天津天正信达供应：RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材，开云在线登录拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台，主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。