小鼠肌糖原(MG)ELISA试剂盒科研说明书

　　小鼠肌糖原(MG)ELISA试剂盒科研说明书

　　小鼠肌糖原(MG)ELISA试剂盒‌是一种用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中肌糖原含量的科研工具，采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理。

　　实验原理

　　试剂盒通过预先包被的小鼠肌糖原(MG)捕获抗体，依次加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体，经温育后洗涤，使用TMB底物显色。颜色深浅与样品中肌糖原含量呈正相关，最终在450nm波长下测定吸光度(OD值)并计算浓度。

　　样本处理及要求

　　血清‌：全血标本室温放置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清检测或-20℃/-80℃保存(避免反复冻融)。

　　血浆‌：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃、1000×g离心15分钟，取上清。

　　组织匀浆‌：用预冷PBS冲洗组织，称重后按1:9比例加入PBS(推荐含蛋白酶抑制剂)，冰上研磨，可进行超声破碎或反复冻融，5000×g离心5~10分钟取上清。

　　细胞培养上清‌：1000×g离心20分钟，取上清即可检测。

　　试剂盒组成(96孔配置)

　　名称 配置

　　微孔酶标板 8孔×12条

　　标准品 0.3 mL × 6管(浓度：480、240、120、60、30、15 ng/mL)

　　样本稀释液 6 mL

　　检测抗体-HRP 10 mL

　　20×洗涤缓冲液 25 mL

　　底物A 6 mL

　　底物B 6 mL

　　终止液 6 mL

　　封板膜 2张

　　说明书 1份

　　自封袋 1个

　　操作步骤简要

　　试剂与样本平衡至室温(20–25℃)。

　　设置标准品孔和样本孔，加入50μL标准品或待测样本。

　　每孔加入HRP标记检测抗体100μL，封板后37℃温育60分钟。

　　洗板5次，拍干。

　　每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

　　加入终止液50μL终止反应。

　　15分钟内于450nm测定OD值，根据标准曲线计算浓度。

　　注意事项

　　所有试剂使用前需平衡至室温。

　　洗涤需净，防止交叉污染。

　　底物避光保存，变蓝则不可使用。

　　避免标本溶血，以免影响结果。

　　不同批号试剂勿混用。

　　注：本公司产品供科研实验，以上供参考!

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