ELISA液体样本处理方法及收集注意事项

　　ELISA液体样本处理方法及收集注意事项

　　一、通用基础处理流程

　　所有ELISA液体样本都需用无菌管收集，在2~8℃条件下以2000~3000转/分离心20分钟左右，去除沉淀和悬浮物，收集上层澄清上清液即可用于后续检测，若存放过程中出现沉淀，使用前需再次离心处理。

　　二、不同类型液体样本的专属处理方法

　　血清样本‌

　　用无抗凝剂的无菌试管采集新鲜血液，室温静置10~30分钟让血液自然凝固，再按通用流程离心取上清，避免剧烈摇晃引发溶血。

　　血浆样本‌

　　根据检测需求提前选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，采血后立即轻柔颠倒混匀10~20分钟，再按通用流程离心取上清，注意不要触碰中间层的白细胞和血小板。

　　尿液、唾液、脑脊液、细胞培养上清等样本‌

　　直接用无菌管收集样本，按通用流程完成离心取上清即可，细胞培养上清需额外注意提前去除残留的细胞碎片。

　　三、收集与保存注意事项

　　严禁使用含有‌NaN₃‌的样本，它会抑制体系中HRP酶的活性，直接导致检测出现假阴性结果。

　　样本采集后建议尽快完成检测，若无法当天检测，需按单次使用量分装后置于-20℃或-80℃环境冻存，严格避免反复冻融，防止目标蛋白降解失活。

　　全程避免样本发生溶血，红细胞破裂释放的过氧化物酶类物质会引发非特异性显色，造成假阳性，同时也要防止细菌污染，避免引入内源性干扰物。

　　部分特殊样本(如牛奶、蜂蜜)需提前参考对应文献做预前处理，再按通用流程完成离心操作。

　　步骤流程：

　　标准品和样本的添加

　　加入检测抗体

　　封板和孵育

　　洗涤

　　加入底物B

　　避光孵育

　　加入终止液

　　数据检测

　　注：以上科研产品资料供参考，具体可咨询技术老师!

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