如何判断ELISA试剂盒的灵敏度是否达标
结合之前提到的ELISA试剂盒灵敏度相关背景信息,判断其灵敏度是否达标可通过三步完成,全程可落地验证,避免虚标产品影响实验结果。
一、说明书标称参数
明确区分检测限LOD和定量限LOQ,LOD数值越低代表理论灵敏度越高。
确认标称LOD单位符合实验需求,低丰度靶标需达到pg/mL级别,且仅标注“高灵敏度"无具体数值的产品直接判定为不达标。
标称LOQ数值,若实验需要精确定量低浓度样本,LOQ需高于LOD且满足CV≤20%的要求。
二、通过标准曲线直观验证
观察标准曲线非零浓度点,该点浓度越低,试剂盒实际设计灵敏度越高。
检查低浓度区拟合优度,要求R²≥0.99,低浓度点无明显偏离曲线的情况。
查看低浓度区曲线斜率,斜率越陡峭,对低浓度靶标的响应灵敏度越高。
三、实验实测完成最终判定
重复检测20次以上空白零标准品,用酶标仪读取所有孔OD值。
按公式LOD=空白信号均值+3×空白信号标准差计算实测检测限。
验证信噪比S/N≥3,低浓度点变异系数CV≤20%,回收率在80%-120%区间即为达标。
注:以上科研产品资料供参考,具体可咨询技术老师!
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