Elisa实验：血浆标本的采集与保存

　　Elisa实验：血浆标本的采集与保存

　　ELISA实验血浆标本采集规范

　　抗凝管选择‌：优先选‌EDTA-K2/EDTA-Na2紫色帽抗凝管‌，适配绝大多数ELISA靶标检测;检测激素类、小分子物质可选肝素锂绿色帽管;凝血相关指标用柠檬酸钠蓝色帽管，‌绝对不能用含促凝剂的普通血清管‌。

　　采集操作要点‌：静脉采血5-10mL，采血后立即轻轻颠倒试管8-10次，让抗凝剂与血液充分混匀，严禁剧烈震荡，避免直接引发溶血。

　　即时离心要求‌：采集后‌30分钟内‌完成离心，设置2-8℃、1000×g离心15分钟;若需去除血小板残留，可二次4℃、3000g离心10分钟，避免细胞碎片混入。

　　上清吸取注意‌：小心吸取上层清亮血浆，绝对不能触碰中间白细胞层和下层红细胞，一旦混入红细胞会直接导致后续检测背景飙升。

　　血浆标本分级保存方案

　　关键避坑要点

　　严重溶血样本直接弃用：血红蛋白自带类过氧化物酶活性，会直接破坏HRP酶活性，引发全板高背景、假阳性结果。

　　高风险样本加保护剂：检测易降解的细胞因子、炎症介质时，可提前加入蛋白酶抑制剂鸡尾酒，抑制样本中内源性蛋白酶对靶标的降解。

　　复融后预处理：冻存样本取出后室温复融，再次4℃、1000×g离心5分钟，取上清再用于实验，避免底部析出的蛋白沉淀干扰读数。

　　禁用NaN₃：血浆样本中绝对不能添加叠氮钠，它会直接灭活HRP标记酶，导致全板无显色、信号丢失。

　　注：以上科研产品资料供参考!

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