台盼蓝染色液资料详解
台盼蓝染色液概述
台盼蓝(Trypan Blue)是一种细胞活性染料,化学式为C₃₄H₂₄N₆Na₄O₁₄S₄,分子量960.805,CAS号72-57-1,呈蓝灰色粉末状,溶于水,微溶于乙醇。其核心功能是通过染色区分活细胞与死细胞:活细胞因膜结构完整而拒染,死细胞因膜通透性增加被染成蓝色。
主要用途
细胞活性检测:
用于细胞培养中存活率评估,如贴壁细胞消化后或悬浮细胞的活力分析。
病毒检测中辅助判断细胞感染状态。
活体染色:
巨噬细胞吞噬台盼蓝后可用于活体染色。
其他应用:
眼科手术中前囊染色、角膜内皮细胞质量评估。
配制与使用方法
母液配制:
4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,定容至100mL,过滤后4℃保存。
工作液稀释:
使用前用PBS将母液稀释至0.4%。
染色步骤:
细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液按9:1混合,终浓度0.04%。
染色时间控制在3-10分钟内,避免活细胞因染料积累而误染。
结果观察:
显微镜下活细胞透明,死细胞显蓝色,通过血球计数板计算存活率。
注意事项
安全性:台盼蓝为2B类致癌物,操作时需戴手套,避免接触皮肤或吸入。
染色时间:超过10分钟可能导致活细胞异常着色,影响结果准确性。
储存条件:4℃避光保存,长期存放可能出现沉淀,37℃水浴可溶解。
替代方案
若细胞存活率>80%,可优先选择荧光核酸染料(如PI)以减少假阳性。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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