销售咨询热线:
15502280048
资料下载
当前位置:首页 > 资料下载 > 大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒实验使用说明

大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒实验使用说明

发表时间:2025/9/26  |  点击率:132
 
提 供 商: 开云在线登录 资料大小:
图片类型: 下载次数: 0
资料类型: PDF 浏览次数: 132
 

  大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒实验原理

  大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒的实验原理主要基于‌双抗体夹心法‌,通过特异性抗体捕获目标蛋白并显色定量。以下是详细解析:

  一、核心检测原理

  抗体包被‌

  试剂盒预包被抗Ki-67蛋白的单克隆抗体于酶标板微孔中,形成固相捕获层‌。

  抗原-抗体结合‌

  样本或标准品中的Ki-67蛋白与包被抗体特异性结合,形成“抗体-抗原"复合物‌。

  信号放大‌

  加入生物素标记的二抗(抗Ki-67多克隆抗体),与已结合的抗原形成“抗体-抗原-二抗"复合物‌。

  通过链霉亲和素-生物素-过氧化物酶(SA-ABC)系统进一步放大信号‌。

  显色与定量‌

  加入TMB显色底物后,酶催化反应生成蓝色产物,终止液变黄,在450nm波长下检测吸光度(OD值),Ki-67浓度与OD值呈正比‌。

  二、关键组分与流程

  试剂盒组分‌:包被抗体、生物素化二抗、SA-ABC复合物、TMB底物、终止液等‌。

  操作步骤‌:

  样本稀释与加样

  37℃孵育(通常1小时)

  洗涤去除未结合物质

  加入二抗与SA-ABC复合物

  显色反应后终止并读数

  三、技术特点

  高特异性‌:双抗体夹心法可减少交叉反应,提高检测准确性‌。

  灵敏度‌:检测范围通常为0.312-20ng/mL,适用于低丰度蛋白检测‌。

  标准化‌:需通过标准曲线计算样本浓度,确保结果可比性‌。

  四、注意事项

  样本处理‌:避免反复冻融,建议使用新鲜组织或血清样本‌。

  干扰因素‌:高浓度内源性生物素或异嗜性抗体可能影响结果,需通过稀释或阻断剂处理‌。

  如需进一步了解Ki-67的生物学功能或临床意义,可参考免疫组化检测的相关研究‌。

  注:仅供科研使用,以上资料供参考,如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

  天津天正信达供应:RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材,开云在线登录拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台,主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。

 
文件下载