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大鼠成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒实验使用说明书

发表时间:2025/9/29  |  点击率:5
 
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大鼠成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒实验使用说明书

  BS-8510 成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒

  有效期:6个月(4℃避光保存)

  一、试剂盒组成

  预包被酶标板:96孔/48孔,包被抗大鼠FGFR1单抗。

  标准品:6个浓度梯度(0-1000 pg/mL),冻干粉需复溶。

  生物素化检测抗体:HRP标记,30倍浓缩液(0.4 mL)。

  显色系统:TMB底物液(15 mL)、终止液(2M H₂SO₄,15 mL)。

  辅助试剂:洗涤缓冲液(30×浓缩液)、样本稀释液(含1% BSA)。

  二、实验流程

  样本准备

  血清/血浆:采集后3000×g离心10分钟,避免溶血。

  组织匀浆:按1:9(w/v)加入PBS匀浆,离心取上清。

  细胞上清:直接检测或离心去除碎片。

  保存:短期4℃(≤48小时),长期-80℃(避免反复冻融)。

  检测步骤

  加样:标准品/样本各100μL/孔,37℃孵育90分钟。

  洗涤:洗涤缓冲液(1:20稀释)洗板3次,拍干。

  加抗体:生物素化抗体100μL/孔,37℃孵育60分钟。

  显色:TMB底物液100μL/孔,避光反应15分钟,终止液50μL/孔。

  读数:450nm波长测OD值,绘制标准曲线计算浓度。

  三、注意事项

  交叉反应:本试剂盒特异性针对大鼠FGFR1,与人源FGFR1交叉反应率<5%。

  灵敏度:检测下限为15 pg/mL,线性范围50-1000 pg/mL。

  干扰因素:避免高脂或溶血样本,建议稀释后复测。

  质量控制:每板需设空白孔、标准品复孔,CV值应<10%。

  四、数据示例

  标准品浓度 (pg/mL)OD450均值

  00.05

  500.32

  1000.67

  拟合曲线:建议采用四参数逻辑回归(4PL)模型。

  五、技术支持

  问题排查:若OD值异常,检查洗涤步骤或底物避光性。

  定制服务:可提供大鼠FGFR1重组蛋白(15kDa)作为阳性对照

  注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒


 
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