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大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒技术说明书

发表时间:2025/10/9  |  点击率:27
 
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  大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒实验原理

  BS-3378 大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒

  一:实验原理

  大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒的实验原理基于‌双抗体夹心法‌的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,其核心步骤如下:

  1. ‌包被抗体固定‌

  捕获抗体(包被抗体)预先包被在微孔板表面,与样本中的目标蛋白(GHRP)特异性结合‌。

  2. ‌样本孵育与结合‌

  加入待测样本(如大鼠血清、血浆等),目标蛋白与包被抗体形成“抗原-抗体"复合物‌。

  3. ‌酶标抗体显色‌

  加入酶标记的检测抗体,与目标

  蛋白的另一表位结合,形成“夹心"结构。随后加入底物(如TMB),在酶催化下显色,颜色深浅与目标蛋白浓度成正比‌。

  4. ‌终止与检测‌

  加入终止液终止反应,通过酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值),根据标准曲线计算样本中GHRP的浓度‌。

     image.png

  关键特性

  灵敏度‌:依赖抗体配对的特异性,通常可检测pg/mL级浓度‌。

  样本类型‌:适用于血清、血浆、细胞培养上清等‌。

  标准化‌:需通过标准品建立浓度-信号曲线,确保定量准确性‌。

  三、操作流程

  样本前处理

  血清/血浆:离心后取上清,1:5稀释(避免溶血样本)。

  组织匀浆:PBS研磨后离心,取上清检测。

  检测步骤

  标准品梯度稀释(0/5/20/50/100 pg/mL)。

  每孔加100μL标准品/样本,37℃孵育90分钟。

  洗涤后加100μL生物素二抗,37℃孵育30分钟。

  加100μL HRP-链霉亲和素,避光孵育20分钟。

  显色10分钟,加终止液后30分钟内读450nm。

  数据分析

  标准曲线拟合:四参数逻辑回归(4PL)。

  样本浓度=标准曲线值×稀释倍数。

  注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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